日韩色综合_久久久久久精品国产观看2010_日本视频精品_久久精品国产亚洲av夜色九虎_来一水AV@lysav

                            網(wǎng)站首頁(yè)技術(shù)中心 > 人食管癌細(xì)胞(Eca-109)培養(yǎng)說(shuō)明書(shū)
                            產(chǎn)品目錄
                            人食管癌細(xì)胞(Eca-109)培養(yǎng)說(shuō)明書(shū)
                            更新時(shí)間:2018-08-14 點(diǎn)擊量:4346

                            人食管癌細(xì)胞(Eca-109)

                            貨號(hào):HDCL-037

                            細(xì)胞特性

                            1) 來(lái)源:食管

                            2) 形態(tài)上皮細(xì)胞

                            3) 含量:>1x106 個(gè)/mL

                            4) 污染:支原體、細(xì)菌、酵母和真菌檢測(cè)為陰性

                            5) 規(guī)格:T75瓶或者1mL凍存管包裝

                             

                            運(yùn)輸和保存:使用含有胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,1000RPM,常溫條件離心5min后潔凈操作臺(tái)棄去上清,加入推薦使用的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)傳代達(dá)到細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),再進(jìn)行凍存。具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。

                             

                            細(xì)胞用途:僅供科研使用。

                                                   

                            細(xì)胞培養(yǎng)步驟

                            一.培養(yǎng)基培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

                            1) 準(zhǔn)備RPMI-1640養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;胎牛血清,10%。

                            2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

                            3) 凍存液90%*培養(yǎng)基,10%DMSO現(xiàn)用現(xiàn)液氮儲(chǔ)存。

                            二. 細(xì)胞處理

                            1) 復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或將細(xì)胞懸液加入10cm皿中加入8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

                            2) 細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%可進(jìn)行傳代培養(yǎng)

                            對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

                            1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2

                            2. 加2ml消化液0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化

                            3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

                            4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中

                            3)細(xì)胞凍存:細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO進(jìn)行凍存

                             

                            注意事項(xiàng):

                            1. 收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系

                            2. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為潛在的生物危害性必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

                             

                            293T細(xì)胞培養(yǎng)說(shuō)明書(shū) 
                            A549-DDP細(xì)胞培養(yǎng)說(shuō)明書(shū)

                             

                            滬公網(wǎng)安備 31011802001677號(hào)

                            日韩色综合_久久久久久精品国产观看2010_日本视频精品_久久精品国产亚洲av夜色九虎_来一水AV@lysav

                                  
                                  

                                      
                                      

                                                
                                                

                                                      松阳县| 扶沟县| 玉溪市| 开化县| 华亭县| 富川| 宁陕县| 科尔| 古丈县| 孙吴县| 普定县| 五原县| 正阳县| 隆德县| 新化县| 眉山市| 黔西县| 江源县| 湖北省| 安阳县| 辽宁省| 孙吴县| 汽车| 原平市| 监利县| 黑龙江省| 历史| 克山县| 富平县| 黎平县| 张北县| 静海县| 怀仁县| 安康市| 新邵县| 漳浦县| 聊城市| 吴川市| 紫阳县| 峨眉山市| 兴隆县|