日韩色综合_久久久久久精品国产观看2010_日本视频精品_久久精品国产亚洲av夜色九虎_来一水AV@lysav

                            網(wǎng)站首頁技術(shù)中心 > 黃曲霉毒素B1快速檢測試劑盒說明書
                            產(chǎn)品目錄
                            黃曲霉毒素B1快速檢測試劑盒說明書
                            更新時(shí)間:2019-05-05 點(diǎn)擊量:2285

                            EF39A\K4                     2018-01

                            黃曲霉毒素B1

                            快速檢測試劑盒說明書

                            一、原理

                            本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在微孔條上預(yù)包被偶聯(lián)抗原,樣本中的殘留物黃曲霉毒素B1將和微孔條上預(yù)包被的偶聯(lián)抗原競爭抗黃曲霉毒素B1抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含殘留物黃曲霉毒素B1的含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出相應(yīng)殘留物黃曲霉毒素B1的含量。

                            二、試劑盒特性

                            1. 試劑盒靈敏度:   0.02ppb
                            2. 孵育溫度:       25
                            3. 孵育時(shí)間:       30min15min
                            4. 樣本檢測下限

                            飼料 大米、玉米、花生、組織、食用油··········· 2 ppb

                            1. 交叉反應(yīng)率

                            黃曲霉毒素B1 ······································ 100%

                            黃曲霉毒素M1 ······································ 6.6%

                            黃曲霉毒素B2 ····································· 54.5%

                            黃曲霉毒素G1 ······································· 8.4%

                            黃曲霉毒素G2 ······································· 1.7%

                            1. 樣本回收

                            飼料 大米、玉米、花生、組織、食用油 ······· 95±35%

                            • 試劑盒組成

                            1

                            微量測試孔

                            每條8孔,一板12條

                            2

                            標(biāo)準(zhǔn)液×6瓶

                            (1ml/瓶)

                            0ppb

                            0.02ppb

                            0.06ppb

                            0.18ppb

                            0.54ppb

                            1.62ppb

                            3

                            酶標(biāo)記物

                            7ml

                            紅色帽

                            4

                            抗體工作液

                            7ml

                            藍(lán)色帽

                            5

                            底物A液

                            7ml

                            白色帽

                            6

                            底物B液

                            7ml

                            黑色帽

                            7

                            終止液

                            7ml

                            黃色帽

                            8

                            20X濃縮洗滌液

                            40ml

                            白色帽

                            9

                            20X濃縮復(fù)溶液

                            50ml

                            透明帽

                            四、所用儀器、試劑

                            具備的儀器:酶標(biāo)儀、均質(zhì)器、振蕩器、離心機(jī)、刻度移液管、天平(感量0.01g)、氮吹儀、恒溫箱、打印機(jī)

                            微量移液器:單道 20~200µl、單道100~1000µl、多道 30~300 µl

                                  劑:甲醇、正己烷

                            五、樣本前處理步驟

                            1. 樣本處理前須知

                            (a)實(shí)驗(yàn)中必須使用一次性吸頭,吸取不同試劑時(shí)要更換吸頭。

                            (b)實(shí)驗(yàn)之前須檢查各種實(shí)驗(yàn)器具是否干凈,必要時(shí)可對(duì)實(shí)驗(yàn)器具進(jìn)行清潔,以避免污染干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

                            1. 樣本前處理需配制:

                            配液1  樣本復(fù)溶液: 

                            用去離子水將20×濃縮復(fù)溶液按1:19 

                            (1份20×濃縮復(fù)溶液+19份去離子水)

                            配液2  樣本提取液: 

                            將甲醇與去離子水按7:3比例混合(7份甲醇+3份去離子水)

                            1. 樣本處理:     

                            a組織、飼料、大米、玉米樣本處理方法:

                            1. 取1.0±0.05g研碎的樣本于50ml離心管中;加入5ml樣本提取液,充分振蕩3min20℃ 4000r/min以上離心10min;
                            2. 取上清100µl,加入700µl樣本復(fù)溶液,充分振蕩混勻;
                            3. 取50µl用于分析。

                              樣本稀釋倍數(shù):40  

                            b食用油樣本處理方法:

                            1. 取1.0±0.05g食用油樣本于50ml離心管中;加入5ml樣本提取液,再加入4ml正己烷,充分振蕩3min20℃ 4000r/min以上離心10min;
                            2. 去掉上清,取中間層液體100µl,加入700µl樣本復(fù)溶液,充分振蕩混勻;
                            3. 取50µl用于分析。

                              樣本稀釋倍數(shù):40  

                            c花生樣本處理方法:

                            1.    取1.0±0.05g研碎的花生樣本于50ml離心管

                                 中;加入5ml樣本提取液,再加入4ml正己

                                 ,充分振蕩3min20℃ 4000r/min以上離

                                 心10min;

                            1.   去掉上清,取中間層液體100µl,加入400µl

                                樣本復(fù)溶液,充分振蕩混勻;

                            3.   取50µl用于分析

                                樣本稀釋倍數(shù)25   

                            六、 酶標(biāo)免疫分析程序:

                            1. 測定前應(yīng)須知:
                            1. 使用前將需用試劑和板條的溫度回升至室溫(20~25)。
                            2. 使用之后立即將所有試劑放回2~8
                            3. 在ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的一致性,正確的洗板操作是ELISA測定程序中的要點(diǎn)。
                            4. 所有恒溫孵育過程,避免光線照射,用蓋板膜蓋住微孔板。
                            1. 操作步驟:
                            1. 從2~8冷藏環(huán)境中取出所需試劑,室溫(20~25)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
                            2. 取出框架及需要數(shù)量的微孔,將不用的微孔放入自封袋,保存于2~8
                            3. 配液:將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按所需用量配制洗滌液
                            4. 編號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
                            5. 加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶標(biāo)記物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗體工作液,用蓋板膜蓋板,輕輕振蕩混勻,25℃環(huán)境反應(yīng)30min
                            6. 將孔內(nèi)液體甩干,用稀釋后的洗滌液250µl/孔洗板4~5次,每次間隔15~30秒,用吸水紙拍干(拍干后未清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
                            7. 顯色:加入底物A液50µl/孔,再加入底物B液50µl/孔,輕輕振蕩混勻,25環(huán)境中避光顯色15min
                            8. 測定:加入終止液50µl/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長450/630nm檢測,5min內(nèi)讀數(shù)),測定每孔OD值。

                            七、結(jié)果判定

                            結(jié)果判定有兩種方法,粗略判定可用第1種方法,定量判定用第2種方法。注意樣本吸光度值與其所含黃曲霉毒素B1量成負(fù)相關(guān)。

                            1、粗略判定:

                            用樣本的平均吸光度值與標(biāo)準(zhǔn)值比較即可得出其濃度范圍(ng/ml)。假設(shè)樣本1的吸光度值為0.3,樣本2的吸光度值為1.0,標(biāo)準(zhǔn)液吸光度值分別是:0ppb為2.243; 0.02pb為1.816;0.06ppb為1.415;0.18ppb為0.74;0.54ppb為0.313;1.62ppb為0.155。則樣本1的濃度范圍是0.54ppb~1.62ppb;樣本2的濃度范圍是0.06ppb~0.18ppb,乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中黃曲霉毒素B1實(shí)際濃度。

                            2、定量分析

                            (1)百分吸光率的計(jì)算,標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的百分吸光率等于標(biāo)準(zhǔn)品或樣本的吸光度值的平均值(雙孔)除以個(gè)標(biāo)準(zhǔn)(0標(biāo)準(zhǔn))的吸光度值,再乘以100%,即

                            百分吸光(%)=

                            B

                            ×100%

                            B0

                            B—標(biāo)準(zhǔn)溶液或樣本溶液的平均吸光度值

                            B0—0ng/ml標(biāo)準(zhǔn)溶液的平均吸光度值

                            (2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制與計(jì)算

                            以標(biāo)準(zhǔn)品百分吸光率為縱坐標(biāo),以黃曲霉毒素B1標(biāo)準(zhǔn)品濃(ng/ml)的半對(duì)數(shù)為橫坐標(biāo),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標(biāo)準(zhǔn)曲線中,從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出樣本所對(duì)應(yīng)的濃度,乘以其對(duì)應(yīng)的稀釋倍數(shù)即為樣本中黃曲霉毒素B1實(shí)際濃度。

                            若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進(jìn)行計(jì)算,更便于大量樣本的準(zhǔn)確、快速分析。

                            八、 注意事項(xiàng)

                            1. 室溫低于25℃或試劑及標(biāo)本未回到室溫(20~25℃)會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
                            2. 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會(huì)伴隨著標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
                            3. 混合要均勻,否則會(huì)出現(xiàn)重復(fù)性不好的現(xiàn)象。
                            4. 反應(yīng)終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。
                            5. 不要使用過了有效日期的試劑盒;稀釋或攙雜使用會(huì)引起靈敏度、OD值變化;不要交換使用不同批號(hào)的盒中試劑。
                            6. 不用的微孔板放進(jìn)自封袋重新密封;標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和無色的發(fā)色劑對(duì)光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
                            7. 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。標(biāo)準(zhǔn)品1的吸光度值小于0.5時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。
                            8. 該試劑盒理想反應(yīng)溫度為25℃,溫度過高或過低將導(dǎo)致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

                            九、儲(chǔ)藏條件和保質(zhì)期

                            1. 儲(chǔ)藏條件:試劑盒于2~8保存,不要冷凍。
                            2.  質(zhì) 期:該產(chǎn)品有效期為1年,生產(chǎn)日期見包裝盒。

                            提示:酶標(biāo)板真空包裝袋若有漏氣,酶標(biāo)板仍然正常有效,不影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,請(qǐng)放心使用。

                             

                            農(nóng)業(yè)部生物毒素檢測重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室

                            聯(lián)合研制

                             

                            豬瘟病毒抗體診斷試劑盒說明書

                            孔雀石綠快速檢測試劑盒說明書

                            滬公網(wǎng)安備 31011802001677號(hào)

                            日韩色综合_久久久久久精品国产观看2010_日本视频精品_久久精品国产亚洲av夜色九虎_来一水AV@lysav

                                  
                                  

                                      
                                      

                                                
                                                

                                                      绥滨县| 南昌县| 铅山县| 惠水县| 湘西| 金华市| 临武县| 柳江县| 江达县| 合江县| 中牟县| 额敏县| 丹棱县| 汾阳市| 噶尔县| 临西县| 小金县| 奈曼旗| 孟州市| 青海省| 高唐县| 大方县| 昌都县| 武宣县| 凤山县| 邵阳市| 法库县| 双峰县| 正宁县| 墨竹工卡县| 安化县| 略阳县| 库尔勒市| 吴江市| 巴马| 贡觉县| 揭阳市| 五峰| 盐边县| 沙湾县| 长子县|