日韩色综合_久久久久久精品国产观看2010_日本视频精品_久久精品国产亚洲av夜色九虎_来一水AV@lysav

                            網站首頁技術中心 > 黃曲霉毒素總量快速檢測試劑盒說明書
                            產品目錄
                            黃曲霉毒素總量快速檢測試劑盒說明書
                            更新時間:2019-05-05 點擊量:1778

                            EF46A\K4                     2018-01

                            黃曲霉毒素總量

                            快速檢測試劑盒說明書

                            一、原理

                            本試劑盒采用間接競爭ELISA方法,在微孔條上預包被偶聯(lián)抗原,樣本中的殘留物黃曲霉毒素總量將和微孔條上預包被的偶聯(lián)抗原競爭抗黃曲霉毒素總量抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光值與其所含殘留物黃曲霉毒素總量的含量成負相關,與標準曲線比較即可得出相應殘留物黃曲霉毒素總量的含量。

                            二、試劑盒特性

                            1. 試劑盒靈敏度:   0.02ppb
                            2. 孵育溫度:       25
                            3. 孵育時間:       30min15min
                            4. 樣本檢測下限

                            飼料 大米、玉米、花生、組織、食用油··········· 2 ppb

                            1. 交叉反應率

                            黃曲霉毒素B1  ··································· 100%

                            黃曲霉毒素M1 ····································· 91.2%

                            黃曲霉毒素B2 ····································· 68.4%

                            黃曲霉毒素G1 ······································· 4.7%

                            黃曲霉毒素G2 ······································· 2.7%

                            1. 樣本回收

                            飼料 大米、玉米、花生、組織、食用油 ······· 95±35%

                            • 試劑盒組成

                            1

                            微量測試孔

                            每條8孔,一板12條

                            2

                            標準液×6瓶

                            (1ml/瓶)

                            0ppb

                            0.02ppb

                            0.06ppb

                            0.18ppb

                            0.54ppb

                            1.62ppb

                            3

                            酶標記物

                            7ml

                            紅色帽

                            4

                            抗體工作液

                            7ml

                            藍色帽

                            5

                            底物A液

                            7ml

                            白色帽

                            6

                            底物B液

                            7ml

                            黑色帽

                            7

                            終止液

                            7ml

                            黃色帽

                            8

                            20X濃縮洗滌液

                            40ml

                            白色帽

                            9

                            20X濃縮復溶液

                            50ml

                            透明帽

                            四、所用儀器、試劑

                            具備的儀器:酶標儀、均質器、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g)、氮吹儀、恒溫箱、打印機

                            微量移液器:單道 20~200µl、單道100~1000µl、多道 30~300 µl

                                  劑:甲醇、正己烷

                            五、樣本前處理步驟

                            1. 樣本處理前須知

                            (a)實驗中必須使用一次性吸頭,吸取不同試劑時要更換吸頭。

                            (b)實驗之前須檢查各種實驗器具是否干凈,必要時可對實驗器具進行清潔,以避免污染干擾實驗結果。

                            1. 樣本前處理需配制:

                            配液1  樣本復溶液: 

                            用去離子水將20×濃縮復溶液按1:19 

                            (1份20×濃縮復溶液+19份去離子水)

                            配液2  樣本提取液: 

                            將甲醇與去離子水按7:3比例混合(7份甲醇+3份去離子水)

                            1. 樣本處理:     

                            a組織、飼料、大米、玉米樣本處理方法:

                            1. 取1.0±0.05g研碎的樣本于50ml離心管中;加入5ml樣本提取液,充分振蕩3min20℃ 4000r/min以上離心10min;
                            2. 取上清100µl,加入700µl樣本復溶液,充分振蕩混勻;
                            3. 取50µl用于分析。

                              樣本稀釋倍數:40  

                            b食用油樣本處理方法:

                            1. 取1.0±0.05g食用油樣本于50ml離心管中;加入5ml樣本提取液,再加入4ml正己烷,充分振蕩3min20℃ 4000r/min以上離心10min;
                            2. 去掉上清,取中間層液體100µl,加入700µl樣本復溶液,充分振蕩混勻;
                            3. 取50µl用于分析。

                              樣本稀釋倍數:40   

                            c花生樣本處理方法:

                            1.    取1.0±0.05g研碎的花生樣本于50ml離心管

                                 中;加入5ml樣本提取液,再加入4ml正己

                                 ,充分振蕩3min20℃ 4000r/min以上離

                                 心10min;

                            1.   去掉上清,取中間層液體100µl,加入400µl

                                樣本復溶液,充分振蕩混勻;

                            3.   取50µl用于分析

                                樣本稀釋倍數25  

                            六、 酶標免疫分析程序:

                            1. 測定前應須知:
                            1. 使用前將需用試劑和板條的溫度回升至室溫(20~25)。
                            2. 使用之后立即將所有試劑放回2~8
                            3. 在ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的一致性,正確的洗板操作是ELISA測定程序中的要點。
                            4. 所有恒溫孵育過程,避免光線照射,用蓋板膜蓋住微孔板。
                            1. 操作步驟:
                            1. 從2~8冷藏環(huán)境中取出所需試劑,室溫(20~25)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
                            2. 取出框架及需要數量的微孔,將不用的微孔放入自封袋,保存于2~8
                            3. 配液:將40ml濃縮洗滌液(20倍濃縮)用去離子水按照1:19稀釋(1份濃縮洗滌液+19份去離子水),或按所需用量配制洗滌液
                            4. 編號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
                            5. 加標準品/樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶標記物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗體工作液,用蓋板膜蓋板,輕輕振蕩混勻,25℃環(huán)境反應30min
                            6. 將孔內液體甩干,用稀釋后的洗滌液250µl/孔洗板4~5次,每次間隔15~30秒,用吸水紙拍干(拍干后未清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
                            7. 顯色:加入底物A液50µl/孔,再加入底物B液50µl/孔,輕輕振蕩混勻,25環(huán)境中避光顯色15min
                            8. 測定:加入終止液50µl/孔,輕輕振蕩混勻,設定酶標儀于450nm處(建議用雙波長450/630nm檢測,5min內讀數),測定每孔OD值。

                            七、結果判定

                            結果判定有兩種方法,粗略判定可用第1種方法,定量判定用第2種方法。注意樣本吸光度值與其所含黃曲霉毒素總量量成負相關。

                            1、粗略判定:

                            用樣本的平均吸光度值與標準值比較即可得出其濃度范圍(ng/ml)。假設樣本1的吸光度值為0.3,樣本2的吸光度值為1.0,標準液吸光度值分別是:0ppb為2.243; 0.02pb為1.816;0.06ppb為1.415;0.18ppb為0.74;0.54ppb為0.313;1.62ppb為0.155。則樣本1的濃度范圍是0.54ppb~1.62ppb;樣本2的濃度范圍是0.06ppb~0.18ppb,乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中黃曲霉毒素總量實際濃度。

                            2、定量分析

                            (1)百分吸光率的計算,標準品或樣本的百分吸光率等于標準品或樣本的吸光度值的平均值(雙孔)除以個標準(0標準)的吸光度值,再乘以100%,即

                            百分吸光(%)=

                            B

                            ×100%

                            B0

                            B—標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值

                            B0—0ng/ml標準溶液的平均吸光度值

                            (2)標準曲線的繪制與計算

                            以標準品百分吸光率為縱坐標,以黃曲霉毒素總量標準品濃(ng/ml)的半對數為橫坐標,繪制標準曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中,從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度,乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中黃曲霉毒素總量實際濃度。

                            若利用試劑盒專業(yè)分析軟件進行計算,更便于大量樣本的準確、快速分析。

                            八、 注意事項

                            1. 室溫低于25℃或試劑及標本未回到室溫(20~25℃)會導致所有標準的OD值偏低。
                            2. 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會伴隨著標準曲線不成線性,重復性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應立即進行下一步操作。
                            3. 混合要均勻,否則會出現(xiàn)重復性不好的現(xiàn)象。
                            4. 反應終止液為2M硫酸,避免接觸皮膚。
                            5. 不要使用過了有效日期的試劑盒;稀釋或攙雜使用會引起靈敏度、OD值變化;不要交換使用不同批號的盒中試劑。
                            6. 不用的微孔板放進自封袋重新密封;標準物質和無色的發(fā)色劑對光敏感,因此要避免直接暴露在光線下。
                            7. 顯色液若有任何顏色表明變質,應當棄之。標準品1的吸光度值小于0.5時,表示試劑可能變質。
                            8. 該試劑盒理想反應溫度為25℃,溫度過高或過低將導致檢測吸光度值和靈敏度發(fā)生變化。

                            九、儲藏條件和保質期

                            1. 儲藏條件:試劑盒于2~8保存,不要冷凍。
                            2.   期:該產品有效期為1年,生產日期見包裝盒。

                            提示:酶標板真空包裝袋若有漏氣,酶標板仍然正常有效,不影響實驗結果,請放心使用。

                             

                            農業(yè)部生物毒素檢測重點實驗室

                            聯(lián)合研制

                             

                            黃曲霉毒素B1快速檢測試劑盒說明書

                            喹諾酮類快速檢測試劑盒說明書

                            雞傳染性法氏囊病病毒VP2抗體診斷試劑盒(酶聯(lián)免疫法)說明書

                            滬公網安備 31011802001677號

                            日韩色综合_久久久久久精品国产观看2010_日本视频精品_久久精品国产亚洲av夜色九虎_来一水AV@lysav

                                  
                                  

                                      
                                      

                                                
                                                

                                                      莆田市| 邵阳市| 孝昌县| 贡山| 樟树市| 平阴县| 洞头县| 株洲县| 冕宁县| 理塘县| 景洪市| 宣威市| 拉孜县| 富顺县| 鄄城县| 海伦市| 老河口市| 平潭县| 昌宁县| 庆元县| 奉节县| 两当县| 寻乌县| 磐安县| 宁都县| 江门市| 锡林浩特市| 阿巴嘎旗| 福安市| 南木林县| 疏附县| 仁化县| 杭锦后旗| 普兰县| 万州区| 新河县| 昌图县| 垫江县| 咸丰县| 鹿泉市| 望江县|