日韩色综合_久久久久久精品国产观看2010_日本视频精品_久久精品国产亚洲av夜色九虎_来一水AV@lysav

                            網(wǎng)站首頁(yè)技術(shù)中心 > 酶免—電擴(kuò)散測(cè)定技術(shù)
                            產(chǎn)品目錄
                            酶免—電擴(kuò)散測(cè)定技術(shù)
                            更新時(shí)間:2011-09-09 點(diǎn)擊量:1359

                            酶免—電擴(kuò)散測(cè)定技術(shù)

                             

                            一,酶聯(lián)免疫電擴(kuò)散測(cè)定技術(shù)的原理

                            酶聯(lián)免疫電擴(kuò)散是免疫電擴(kuò)散(Immunoelectrodiffusion,簡(jiǎn)稱IED)與免疫酶技術(shù)相結(jié)合的樣新技術(shù),其原理在于通過(guò)免疫電擴(kuò)散,抗原與該抗原相應(yīng)的IgG快速形成免疫復(fù)合物,接著用酶標(biāo)記的抗IgG免疫球蛋白與免疫復(fù)合物孵育結(jié)合,然后用底物顯色。

                            酶聯(lián)免疫電擴(kuò)散技術(shù)增加了免疫電擴(kuò)散的靈敏度,對(duì)分析復(fù)雜的抗原反應(yīng)和不同類型的免疫球蛋白,都有作用。

                            二,酶聯(lián)免疫電擴(kuò)散測(cè)定技術(shù)的程序

                            1,  器材與設(shè)備

                            電泳儀(包括電泳槽);醋酸纖維薄膜(2.5cm×17cm);微升吸管;大號(hào)培養(yǎng)皿等實(shí)驗(yàn)用玻璃器皿。

                            2,  材料與試劑

                            可溶性抗原溶液;該抗原相應(yīng)的兔抗血清;HRP標(biāo)記的抗兔IgG抗體,其中特異性抗體蛋白的濃度為1.25mg/ml;0.1mol/LpH8.2巴比妥緩沖液;0.2%Haemosol溶液;0.1mol/L Ph7.6Tris緩沖液;0.01mol/LpH7.2 PBS;洗滌液(85gNaCI,500ml巴比妥緩沖液,蒸餾水加至1000ml);底物與供氫體溶液(H2O2DAB4HC1)。

                            3,  實(shí)驗(yàn)程序

                            在醋酸纖維薄膜上用軟鉛筆劃好點(diǎn)樣線,每條點(diǎn)樣線距離膜邊3cm,對(duì)距11cm,在每條點(diǎn)樣線中間用軟鉛筆劃好點(diǎn)樣點(diǎn)。

                            0.1mol/LpH8.2巴比妥緩沖液中浸濕,滴干水,但要保持濕潤(rùn)。

                            用微升吸管點(diǎn)樣,一點(diǎn)加抗原3ul(1ul),另一點(diǎn)加兔抗待測(cè)抗原的血清15ul(5ul),每份點(diǎn)樣的抗原濃度為0.00150ug.

                            電泳條件。用濕濾紙搭橋,電泳緩沖液為0.1mol/L pH8.2巴比妥緩沖液,電流強(qiáng)度為1mA/cm,電泳時(shí)間為2h,抗原端接負(fù)極。

                            電泳完畢,將薄膜浸入洗滌液30min,去多余的血清蛋白與游離抗原。

                            將薄膜浸入0.01mol/L pH 7.2PBS中,振蕩洗滌30min,取出薄膜,滴干余水。

                            將酶標(biāo)記抗體以150稀釋。

                            用稀釋的酶標(biāo)記抗體在室溫孵育2h.

                            0.2%Haemosol溶液中振蕩洗滌15min.

                            Tris緩沖液中振蕩浸洗30min.

                            在底物溶液中浸1min后,觀察顯色結(jié)果。

                             

                            滬公網(wǎng)安備 31011802001677號(hào)

                            日韩色综合_久久久久久精品国产观看2010_日本视频精品_久久精品国产亚洲av夜色九虎_来一水AV@lysav

                                  
                                  

                                      
                                      

                                                
                                                

                                                      金秀| 浠水县| 万山特区| 淮北市| 贵德县| 昌江| 乐都县| 泰和县| 衡阳市| 江陵县| 彭水| 正阳县| 裕民县| 龙南县| 遂宁市| 华容县| 于田县| 五寨县| 天台县| 河源市| 湄潭县| 涪陵区| 德庆县| 凤山市| 射洪县| 萍乡市| 宁陕县| 宣化县| 白山市| 桃江县| 延安市| 诸暨市| 泗阳县| 济南市| 南平市| 平顺县| 库伦旗| 乃东县| 宣汉县| 秦皇岛市| 恩施市|