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                            網站首頁產品展示酶聯(lián)免疫ELISA試劑盒其它ELISA > 48T/96T牛病毒性腹瀉抗體(BVD Ab)酶聯(lián)免疫分析ELISA
                            牛病毒性腹瀉抗體(BVD Ab)酶聯(lián)免疫分析ELISA

                            牛病毒性腹瀉抗體(BVD Ab)酶聯(lián)免疫分析ELISA

                            產品型號: 48T/96T

                            所屬分類:其它ELISA

                            產品時間:2024-08-11

                            簡要描述:牛病毒性腹瀉抗體(BVD Ab)酶聯(lián)免疫分析ELISA價格公道、*,售后服務完整,并提供免費代檢測服務!需要產品說明書及其它詳細信息請直接與我們。

                            詳細說明:

                            目的:本試劑盒用于檢測牛血清,血漿中病毒性腹瀉抗體(BVD Ab)水平。
                            實驗原理:
                              本試劑盒采用雙抗原夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測定標本中牛病毒性腹瀉抗體(BVD Ab)。用純化的牛病毒性腹瀉抗原包被微孔板,制成固相抗原,可與樣品中病毒性腹瀉抗體(BVD Ab)相結合,經洗滌除去未結合的抗原和其他成分后再與HRP標記的病毒性腹瀉抗原結合,形成抗原-抗體-酶標抗原復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標本中牛病毒性腹瀉抗體(BVD Ab)的存在與否。

                            試劑盒組成:
                            試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存
                            說明書 1份 1份 
                            封板膜 2片(48) 2片(96) 
                            密封袋 1個 1個 
                            酶標包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
                            陰性對照 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
                            陽性對照 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃保存
                            酶標試劑 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
                            樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
                            顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
                            顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
                            終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃保存
                            濃縮洗滌液 (20ml×20倍)×1瓶 (20ml×30倍)×1瓶 2-8℃保存

                            樣本處理及要求:
                            1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
                            2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
                            3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
                            4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
                            5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
                            6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
                            7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

                            操作步驟:
                            1. 編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2孔、陽性對照2孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)
                            2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,
                            3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  
                            4. 配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用
                            5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
                            6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
                            7. 溫育:操作同3。
                            8. 洗滌:操作同5。
                            9. 顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘
                            10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
                            11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

                            結果判定:
                              試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
                              臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
                              陰性判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為牛病毒性腹瀉抗體(BVD Ab)陰性
                              陽性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為牛病毒性腹瀉抗體(BVD Ab)陽性
                            注意事項
                            1.操作嚴格按照說明書進行,本試劑不同批號組分不得混用。
                            2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
                            3.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
                            4. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
                            5.底物請避光保存。
                            6.試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準,使用雙波長檢測時,參考波長為630nm
                            7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時必須注意安全。

                            保存條件及有效期
                            1.試劑盒保存:2-8℃。
                            2.有效期:6個月

                             



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